石蠟包埋組織單細(xì)胞樣品制備方法存在的問題

石蠟包埋組織單細(xì)胞制備方法的建立，使流式細(xì)胞術(shù)在腫瘤研究中得到更加廣泛的應(yīng)用。主要存在如下問題。

   1、樣品中的碎片較多，所獲得的DNA組方圖質(zhì)量不及新鮮組織好，組方圖的細(xì)胞峰較寬，細(xì)胞峰CV值較大。

   2、異倍體率較少。由于組方圖的細(xì)胞峰CV值增大，一些接近于二倍體的DNA異倍體峰位被掩蓋。

   3、S期細(xì)胞百分比不如新鮮組織的S期計算準(zhǔn)確，百分比計數(shù)往往偏高，這仍然與細(xì)胞峰增寬有關(guān)。

   4、DNA二倍體標(biāo)準(zhǔn)不穩(wěn)定。在石蠟包埋腫瘤DNA倍體分析研究中，發(fā)現(xiàn)正常組織細(xì)胞的DNA含量與雞紅細(xì)胞DNA含量比值增大。解決二倍體標(biāo)準(zhǔn)不穩(wěn)定的辦法，可將正常組織與腫瘤組織同時包埋于一個石蠟組織塊中，這樣，正常細(xì)胞作為一個二倍體內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)，能減少DNA倍體分析的誤差。